第十节 螺旋体、支原体、衣原体、立克次体检验
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螺旋体(spirochete)螺旋体的基本结构与细菌相似，有细胞壁、核质，对抗生素敏感，分类学上归于细菌范畴。对人和动物致病的有3个属：疏螺旋体属(borrelia)，其中对人致病的有回归热螺旋体和伯氏疏螺旋体；密螺旋体(treponema)，对人致病的有梅毒螺旋体、雅司螺旋体和品他螺旋体等；钩端螺旋体(leptospira)o螺旋体所致疾病主要涉及性传播和自然疫源性疾病。不同种螺旋体所致疾病的种类、传染源、传播途径及临床症状等均不相同，应根据各自的不同特征，在临床不同病期采集合适标本，采用有效检测方法才能确诊，这对预防和治疗螺旋体引起的传染性疾病有着重要意义。
梅毒螺旋体(Treporlema pallidum．TP)
亦称苍白螺旋体，是性传播性疾病(STD)梅毒的病原体。人是梅毒的唯一传染源。梅毒患者的早期损害如硬下疳、扁平湿疣和黏膜白斑最具传染力，其皮肤、黏膜的溃烂或破损区及渗出物中有大量病原体，与之直接接触可传染梅毒。主要的传播途径是性接触传播（约占95%以上），其次是胎传及密切接触如接吻、哺乳等，输入梅毒患者的血液亦可致感染。临床上以早期梅毒（一期、二期梅毒）最多见，占87%。目前梅毒在我国再次流行，在报告的STD病例中处于第4位。它是性病中危害较严重的一种，几乎可侵犯全身各组织和器官，应采取措施予以控制和治疗，防止疾病的进一步扩散。
1．显微镜检查：暗视野显微镜检查是早期梅毒唯一可靠的实验室方法，尤其对已出现硬下疳而梅毒血清反应仍呈阴性者的意义更大，已被世界卫生组织(WHO)指定为性病实验室必备检查项 目之一。直接免疫荧光检查具有高特异性和敏感性，适用于暗视野 显微镜法不适用的标本。其他还有镀银染色法等。
2．血清学实验是诊断梅毒的主要方法，分为两大类。一是非密 螺旋体抗原试验，多用牛心肌的心脂质作为抗原，测定患者血清中 的反应素（抗脂质抗体）o初期梅毒病灶出现后l~2周，血清中反应 素的阳性率为53%~83%，二期梅毒的阳性率可达100%，晚期梅毒 的阳性率为58%~85%，胎传梅毒的阳性率为80%~100%。
常用的试验方法有性病研究所实验室玻片试验(VDRL)、不加 热血清反应素试验(USR)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、甲 苯胺红不加热血清试验(TRUST)。其中USR的方法与VDRL完全 相同，只是改进了抗原制备方法，使血清不必加热灭活；RPR也是 VDRL试验的一种改良，在USR抗原中加入胶体碳作为指示剂， 使试验结果容易判读；TRUST的原理和方法与RPR完全相同，只 是用甲苯胺红染料颗粒代替胶体碳作为指示剂。
此类试验简便、快速、价廉，尤其是RPR和TRUST，便于在一 般实验室推广使用。不仅适用于一二期梅毒的诊断、疗效观察以及 复发或再感染的检测，也适用于大量人群的筛查、婚检、产前检查 和其他健康查体等。此类试验阳性时需用密螺旋体抗原试验进行 确证。
由于此类试验为非特异性抗原试验，因而易发生假阳性反应。
生理性假阳性见于妊娠和老年人(70岁以上可达10%)。生物性假 阳性主要见于结缔组织病和自身免疫性疾病等。
人类免疫缺陷病毒(HIv)感染者的梅毒血清反应有时出现难 以解释的现象，艾滋病合并梅毒感染时，其梅毒血清学试验呈阴性 反应。对怀疑梅毒者，建议同时做HIV抗体检查。
3．另一类血清学试验是密螺旋体抗原试验，即用密螺旋体抗 原检测患者血清中特异性抗体，具有更高的特异性和敏感性，在一 期梅毒的头几天就可检测出特异性抗体，主要用于梅毒的确证，不适用于疗效考察。主要方法有荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TP-PA)、梅毒螺旋体制动试验(TPI)、血清IgM抗体检测、免疫印迹法等。
FTA-ABS被认为是检测梅毒的金标准，对三期梅毒有较高的敏感性和特异性。TPHA具有快速、简便、特异、敏感、无需特殊设备等优点，但对一期梅毒的敏感性不如FIA-ABS。 TPPA与TPHA的原理、方法相同，只是用红色明胶颗粒代替了红细胞。TPI主要用于晚期梅毒及疑难病例的诊断，因操作复杂，临床实验室已很少使用o ELISA法检测血清IgM抗体是目前很多实验室梅毒血清学诊断试验的首选方法。
4．对以上实验方法的选择，WHO推荐用VDRL、RPR法对血清进行过筛试验，出现阳性者用FTA-ABS、TPPA、ELISA(酶联免疫吸附测定法)和免疫印迹试验等方法做确认试验。另外对先天梅毒很难诊断，可用RPR半定量试验每月检测1次反应素效价，连续6个月，或用VDRI，定量试验检查抗体效价变化。如效价增高或稳定在高水平，表明是先天梅毒；如抗体是来自母体的IgG，通常在2—3个月内消失。
5．值得注意的是由于梅毒螺旋体、雅司螺旋体等抗原性相似，所以用血清学试验不可能区别这些密螺旋体及其所致疾病。
非性病密螺旋体
非性病密螺旋体是一组对人致病、但不引起发生STD的密螺旋体。主要有：梅毒螺旋体细长亚种(T.pallidum subspecies-pertenue)，俗称雅司螺旋体，是雅司病的病原体，见于南北回归线之间潮湿而温暖的地区，20世纪40年代我国江苏曾有流行，可累及皮肤和骨骼，临床表现与梅毒相似；梅毒螺旋体皮下亚种引起地方性非性病性梅毒，在非洲、中东、东南亚等地流行，侵犯皮肤、黏膜和骨骼，但先天性感染及心血管、神经系统受累极为罕见；斑点病螺旋体引起品他病，仅累及皮肤，主要流行于中南美洲。
以上三种非性病性螺旋体病的传染源均为人，青少年多见，非性传播，主要通过直接接触感染的皮肤受损处传播，苍蝇也可作为媒介在人与人之间传播。它们的微生物学检验方法与梅毒螺旋体相同，常规方法难以将它们区分开来，需结合流行病学及临床表现加以区分。
钩端螺旋体(Leptospira)
致病性钩端螺旋体能引起人、动物和家畜的钩端螺旋体病(leptospirosis简称钩体病)，是一种典型的人畜共患性疾病。人类接触带菌的野生动物和家畜或它们污染的水源、土壤等时钩体经皮肤进入人体而导致感染。钩体在中性的湿土或水中可存活数月，这在传播上有其重要意义。也可通过胎盘感染而导致流产。钩体对酸和热的抵抗力弱，60℃1min即死亡，0.2%的来苏、1:2000氯化汞、l%苯酚10~30min即可杀死。对青霉素敏感。钩体病为急性传染病，临床表现为高热、全身酸痛，尤其是腓肠肌疼痛，严重者可表现为全身内脏出血和坏死，甚至导致死亡。
钩端螺旋体感染的标本采集方法
1．血液：于发病1周内的钩体血症期，在抗生素治疗前以无菌操作抽取静脉血，即刻接种进行培养或动物实验，此时的阳性检出率较高。患者于发病1周左右开始出现特异性lgM抗体，lgG继之，于病程1个月左右其效价达高峰，抗体可持续数月至数年。常于发病初期和恢复期采集双份血液，测定血清抗体滴度的消长，或采集单份血样测定IgM抗体，有助于早期诊断。
2．尿液：发病第2周起患者尿中逐渐出现钩体，第3周达高峰。由于肾脏中钩体不受血液中特异性抗体的影响，故患者持续从 尿液中排菌可达数周之久。留取标本前需碱化尿液。
3．脑脊液：发病1周内患者可出现脑膜炎症状，在抗生素治疗 前于无菌条件下做腰穿，收集脑脊液。
4．组织：当疑有钩体病的患者或动物死亡后，在最短的时间内 取其肝脏或肾脏组织。
病原学检验包括直接镜检，如直接暗视野镜检、改良镀银染 色、直接荧光抗体检查，分离培养（在致病性螺旋体中，钩体较易培 养成功）以及动物实验等。血清学试验的方法包括显微镜凝集试验 （单份血清效价为1:400或恢复期抗体效价较急性期有4倍以上升 高即有诊断意义）、间接凝集试验（单份血清效价为1:160或恢复期 抗体效价较急性期有4倍以上升高即有诊断意义）、补体结合试验 （血清效价在1:20以上就有诊断意义，病后2~3d就可测出，可协助 早期诊断，但不能分型）、溶血试验、ELISA(用于检测特异性lgM抗 体，特异性和敏感性都高，具有早期诊断价值)；DNA探针杂交、 PCR等分子生物学方法也已引入钩体病的诊断。
伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi．Bb)
又称莱姆螺旋体(Lyme spirochete)o可引起由硬蜱传播的自然 疫源性疾病——莱姆病(Lyme disease．LD)。临床上主要表现为皮 肤慢性移行性红斑(ECM)，以及神经系统、心脏、关节等多脏器、多 系统损伤。该病好发于春夏季，在美洲、欧洲、澳洲及我国东北林区 都有发现，黑龙江省海林县林区是我国的高发区，患者多有蜱叮咬 史，目前在我国10多个省区已分离到Bb。
1．实验室诊断通常采用血清学试验方法，如间接免疫荧光测 定(IFA)、ELISA、IgM检测以及免疫印迹法等。分子生物学技术，如 核酸分子杂交、PCR等，也已广泛应用于LD的诊断和Bb的遗传学分析。
2．药敏：Bb对四环素高度敏感，对氨苄西林、头孢曲松、亚胺培南等高度敏感，对氨基糖苷类、利福平、环丙沙星多耐药。
回归热螺旋体(B.recurren-tis)
回归热是一种以周期性反复发作为特征的急性传染病。引起该病的疏螺旋体有两种：一是回归热螺旋体(B.recurren-tis)，以体虱为传播媒介，引起流行性回归热，目前该病在世界范围内已基本消灭；另一是赫姆疏螺旋体(B.hertmsii)，以软蜱为传播媒介，引起地方性回归热，我国主要见于南疆、山西等地，比较少见。两者临床表现基本相同，为急起急退的发热、全身肌肉酸痛、肝脾肿大，前者更重。
奋森螺旋体(Borrelia vincenti)
正常情况下与梭杆菌等寄居于人类口腔牙龈部。机体抵抗力下降时可引起奋森咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口腔炎等，对青霉素、四环素多敏感。
支原体()
支原体是一类没有细胞壁的原核细胞微生物，通常被划分为远离一般细菌的范畴。实际上真正的支原体仅仅是退化了的芽孢梭菌属细菌。支原体科分为支原体()和脲原体(up-reaplasma)两个属。支原体属有70～100种，其中对人致病的主要是肺炎支原体，生殖支原体也有一定致病性；脲原体属则只有解脲脲原体和人型支原体。支原体因无细胞壁而对理化因素的影响比细菌更敏感，容易被清洁剂和消毒剂灭活，但对醋酸铊、甲醛的抵抗力大于细菌。支原体对干扰细胞壁合成的抗生素，如青霉素类、头孢菌素类、多肽类等耐药，但对干扰蛋白质合成的抗生素，如大环内酯类的红霉素、阿奇霉素，四环素类，氯霉素等多敏感。
肺炎支原体(M.pneumordae，MP)
肺炎支原体是引起**型性肺炎最常见的病原体。支原体肺 炎的发病率可占到所有肺炎病例的20%～30%。易感对象主要是 5~19岁的儿童和年轻人。但近年来发现65岁以上老年人群发生 的社区获得性肺炎中有15%是MP引起的，5岁以下的婴幼儿也 可发生感染，且这些人群一旦发病，症状往往更为严重。支原体肺 炎同时具有地方性和周期性流行的特点，流行周期一般为3—7年。
在流行高峰时，其发病率可达到肺炎总发病率的70%~80%。MP感 染可发生在一年中的任何季节，没有明显的季节流行特征。
1．由于MP培养耗时长(2～3周)，对标本运送及培养基的要求 高，且敏感性一般，而抗原检测及分子生物学方法虽有报道，但尚 无成熟的试剂盒，故病原学检测方法目前很少用作临床常规检测， 但对流行病学调查有一定意义。
2．血清学检测是目前MP临床实验室诊断的主要方法o MP感 染后，可用各种血清学试验检测体内产生的特异性抗体，其中lg水平升高提示MP的新近感染，但阴性时并不能排除MP感 染的可能性。单份血清测定出现高滴度的IgG或双份血清测定（前 后间隔2周）出现lgG滴度4倍以上升高的也提示MP的新近感 染。单测一种类型的抗体往往会出现漏检的情况，因此，应同时检 测几种类型的抗体，有疑问时还应通过双份血清测定观察抗体转 化情况以进行明确诊断。
3．冷凝集试验(cold agglutination test)：是以前常用的MP检测 方法。支原体肺炎患者血清中常可出现高效价的寒冷凝集素（一种 lgM类非特异性抗体），在O~10℃的寒冷情况下，能与O型人红细 胞或自身红细胞的膜抗原结合产生凝集现象。大多在发病后1~2 周开始出现，以后继续增高，于病程3~4周达到高峰，6周后逐渐下降，2~3个月后消失。寒冷凝集素效价≥1:32，或间隔l周以上的2次血清效价有4倍以上增长，对支原体肺炎的诊断有参考意义。
但敏感性和特异性均差，呼吸道合胞病毒感染、腮腺炎、流感等也可出现冷凝集素滴度的非特异性升高，而敏感性不足50%该方法目前已趋于淘汰。另外，试验时必须及时分离血清，决不能在4℃冷藏后分离，切勿将待测血液标本留置20℃以下，室温低于20℃时，应注意放37℃分离。
4．其他血清学试验方法的比较：补体结合试验(正常参考值<1:8)特异性优于冷凝集试验，但由于测定的主要是IgM，因此敏感性偏低；酶免疫测定应强调同时检测lgG和lgM(或IgA)，以提高敏感性；快速检测以金标法最为常见，也应强调同时检测IgG和Ig)，只测定lgM往往不能得到正确的结果，而且快速方法一般只能得到定性结果，这限制了其在临床诊断中的价值。
5．药敏：MP没有细胞壁，因此对β-内酰胺类抗生素天然耐药，磺胺类一般对其也没有作用，治疗的首选药物为大环内酯类，也可选用四环素类（老年人）和喹诺酮类。
解脲脲原体(U.ureaiyicum，Uu)、人型支原体(M hominis．Mh相生殖支原体(M.genitalium．Mg)
1．Uu、Mh和Mg是人类泌尿生殖道最常见的寄生菌，在特定的环境下可以致病，与一些新生儿疾病及成人的泌尿生殖系统疾病有关。它们的主要传播途径为性接触传播和母婴传播。所引起的新生儿疾病主要表现为呼吸道感染和支气管、肺发育不良，以及新生儿中枢神经系统感染等。现已将其引起的泌尿生殖道感染列为性传播性疾病(STD)o有30%~40%的非淋病性尿道炎(nongono-coccal urethritis，NGU)是由Uu所致。 Uu也是引起慢性前列腺炎的病原体之一，为通过尿道上行感染所致，称为“脲原体相关性前列腺炎”。Uu还可导致尿路结石。生殖系统Uu感染可导致不孕不育、自发性流产、早产及死胎等。Mh在性成熟女性的子宫或**的携带率为21%~53%，与女性的激素水平、性经历、避孕方式和文化程度等密切相关。男性携带率低，主要引起输卵管炎、子宫颈炎、盆腔炎，以及新生儿感染等。生殖支原体(M.genitalium，Mg)具有特殊的结构和黏附性，也是泌尿生殖道的重要致病因子，可能与女性的上生殖道感染、新生儿的呼吸道感染等有关。
2．它们的临床实验室诊断方法主要有分离培养、免疫斑点试验(IDT）以及PCR技术扩增特异基因片段等。
(1)直接镜检法：该法简便易行，但临床意义不大，因支原体形态、大小难与组织细胞或渗出液中的其他颗粒相区别，即便阳性，亦需作分离培养。
(2)分离培养法：分离培养是实验诊断支原体感染的唯一可靠方法。支原体分离培养阳性伴有尿道炎症状者，是非淋菌性尿道炎的指征。现已有商品化的支原体培养试剂盒。
(3)血清学检查法：间接血凝法、ELISA、免疫沉淀法等均可测出血清中的支原体抗体。由于人群中普遍具有低滴度的支原体抗体，因此血清学检查必须与支原体分离培养相结合，才能明确诊断。
(4)聚合酶链反应(PCR)：PCR法是检测解脲脲原体的有效方法，具有特异、灵敏、快速的特点，但有假阳性或假阴性的结果。
3．AIDS协同感染。
近年来发现有三种支原体为AIDS协同感染因子，能促使无症状HIV感染者发展为有症状的AIDSo它们分别是发酵支原体(M.ferans)和梨形支原体(M.pirum)。它们在HIV的感染过程中究竟起什么作用，目前还不清楚，但这三种支原体新种，尤其是后二者都具有特殊的尖端结构及吸附宿主细胞的作用，因此已引起人们的高度重视。
衣原体(Chlamydia)
衣原体是一类专性细胞内寄生、有独特发育周期、能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。由于它具有一些与细菌类似的生物学特性，现归属于广义的细菌范畴。衣原体广泛寄生于人类、鸟类及哺乳动物。不同衣原体所致疾病不同，有些只引起动物疾病，如沙眼衣原体中的鼠亚种和鹦鹉热衣原体中的大多数菌株。有些只引起人类疾患，如沙眼衣原体中的沙眼亚种和性病淋巴肉芽肿亚种以及肺炎衣原体。有些是人兽共患病原体，如鹦鹉热衣原体中的部分菌株。肺炎衣原体、沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体一般对四环素和大环内酯类抗生素均敏感，沙眼衣原体对磺胺类多敏感，而其他二者耐药。
沙眼衣原体(C.trachomatis)
1．沙眼衣原体分为三个生物变种，即沙眼生物变种(biovartra-choma)、性病淋巴肉芽肿生物变种(biovar lyvenereum．LGV)和鼠生物变种(biovar mouse)o2．沙眼生物变种专门寄生于人类，易感部位是黏膜的鳞状上皮细胞。人与人之间的传播方式有两种明显不同类型：在沙眼流行地区，主要通过眼一眼及眼一手一眼传播，引起地方性致盲沙眼；另一种系性接触传播，是STD中最常见的病原体，可引起泌尿生殖系感染、新生儿经产道时感染以及其他合并症，主要有新生儿包涵体结膜炎、新生儿肺炎、NGU、附睾炎、前列腺炎、官颈炎、输卵管炎、直肠炎等，且在女性易致不育和异位妊娠等严重后果。
1．对急性期沙眼或包涵体结膜炎患者，以临床诊断为主，实验室检查可取眼穹隆部及眼结膜分泌物做涂片，染色检查上皮细胞内有无包涵体。
2．对泌尿生殖道感染，临床症状不典型，主要依靠实验室检查，可采集泌尿生殖道标本做Giemsa或碘液染色检查包涵体，但敏感性差，阳性率仅约40%。细胞培养法是目前生殖道衣原体检测的最好方法。而且是评价其他实验室诊断方法的“金标准”，目前已有商品化的试剂盒。衣原体分离培养阳性伴有尿道炎症状者，是非淋菌性尿道炎的指征。从尿道炎患者中分离获得衣原体，并不能断定它是唯一的病原体。因为在30%~50%的非淋菌性尿道炎患者、20%的淋病患者和5%性活跃但无尿道炎症状的人群中，用细胞培养法均可找到沙眼衣原体。
3．采用直接荧光抗体检测标本内的衣原体，一般要求衣原体数>IO个方可判为阳性。有条件的实验室可采用DNA探针和PCR技术、PCR-EIA技术、连接酶链反应(LCR)检测衣原体特异性基因片段。目前还有一些商品化的快速诊断衣原体抗原的方法，如乳胶免疫扩散法、利用单克隆抗体检测衣原体LPS法等。
4．人是性病淋巴肉芽肿亚种(LGV)的天然宿主，经性接触传播，主要侵犯淋巴组织，引起多种临床症状，典型症状是男性腹股沟淋巴肉芽肿。在女性侵犯会阴、肛门和直肠，可形成肠皮肤瘘管；也可引起会阴一肛门一直肠狭窄和梗阻。可采用微量免疫荧光法检测，与其他型沙眼衣原体交叉反应较低，有较高的诊断价值。
肺炎衣原体(C.pneumoniae．衣原体TWAR株)
肺炎衣原体只有一个血清型，即TWAR株，可引起急性呼吸道疾病。社区获得性肺炎、支气管炎和鼻窦炎5%~10%由衣原体引起，还可引起心包炎、心肌炎和心内膜炎，还与冠状动脉疾病有关。
TWAR株只寄生于人类，人与人之间经飞沫或呼吸道分泌物传播。
感染的扩散缓慢，患者之间的传播间隔期平均为30d，在密集人群中流行可持续6个月。TWAR株的感染具有散发和流行交替出现的周期性。散发发病通常持续3~4年，有2~3年的流行期，在流行期间可有数月的短暂暴发。
1．TWAR株感染的实验室诊断，包括病原体分离、血清学检查和特异性核酸片段检测。分离TWAR株比较困难，不适于临床实验室。血清学检查以微量免疫荧光试验(Micro-IF)最为敏感，还可采用补体结合试验。宿主感染TWAR后抗体的出现表现为两种模式：在青少年经常出现初次感染后的免疫反应，早期出现的是补体结合抗体，Micro-IF的抗体出现缓慢，发病3周后不能检测出可达诊断水平的lgM抗体效价，IgG抗体通常6周后才出现；在成年人则表现为再次感染的免疫反应，迅速出现对TWAR株的Micro-IF的IgG抗体，但补体结合抗体通常不出现，IgM抗体不出现或效价偏低(1:32~1:64)。用TWAR抗原进行Micro-IF检测时，急性感染的诊断标准是：双份血清抗体效价有4倍以上升高，IgM抗体效价≥1:16;lgG抗体效价≥1:512。补体结合试验的急性感染诊断标准是：双份血清抗体效价有4倍以上升高，抗体效价≥1:640值得注意的是，血循环中的类风湿因子可以干扰Micro-IF的结果。
2．如上所述，由于感染后lgG抗体存在时间较长，再感染时IgM和补体结合抗体又常为阴性，血清学实验有时难以区分初次感染和再感染，有条件的实验室可采用特异性核酸检测的方法。
鹦鹉热衣原体(C.psittaci)
鹦鹉热衣原体主要引起禽畜感染，少数可因吸入病禽或病兽的感染性分泌物而传染到人，引起呼吸道症状甚至发生肺炎或不明原因的发热，但不很严重，临床上称为鹦鹉热或鸟疫。近年来有鹦鹉衣原体引起心内膜炎的报道。
立克次体(Rickettsia)
立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。其生物学形状与细菌类似，革兰染色阴性，具有细胞壁，有DNA和RNA，对多种抗生素敏感。其共同特点是：大多是人畜共患病：所致疾病多数为自然疫源性疾病；与节肢动物关系密切，或为寄生宿主，或为储存宿主，或同时为传播媒介；专性细胞内寄生；多形态性，主要为球杆状；大小介于细菌和病毒之间，生长时需要宿主细胞提供生长辅助因子。
对人类致病的立克次体包括4个属：立克次体属(rickettsia)、柯克斯体属(coriella)、巴尔通体属(bartoneleaceae)，原称为罗沙利马体属和埃里希体属(ehrlichia)。立克次体属又分为三个生物型：斑点伤寒群、斑点Q热群、恙虫病群。立克次体是引起斑疹伤寒、恙虫病、Q热等传染病的病原体，虽然在流行病学上各自有所不同，但临床表现多有共同之处。潜伏期多为3~14d，约有一半病例为突然起病，以发热、皮疹为主要特征。
四环素、利福平、氟喹诺酮类（恙虫病立克次体除外）和某些大环内酯类抗生素在体外抗立克次体有效，而青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、磺胺类等无效。
立克次体斑疹伤寒群(typhus group)
1．有三种：一是引起流行性（虱传）斑疹伤寒的普氏立克次体(R．prowazekii)；二是引起地方性（鼠型）斑疹伤寒的莫氏立克次体(R.mooserii)）三是引起加拿大斑疹伤寒的加拿大立克次体(R.Cana-da)。普氏和莫氏立克次体所致的斑疹伤寒症状相似，以头痛、高热、全身皮疹为主要特征。加拿大立克次体所致疾病表现为高热、头痛、畏寒，手掌、腿和腹部出现皮疹。
2．普氏立克次体（又称典型或复发性）斑疹伤寒，主要传染源是病人，传播媒介为（人）体虱，可引起大规模流行，其范围成世界性分布，未经治疗的病人死亡率可高达10%~40%。由莫氏立克次体所致鼠型斑疹伤寒的传染源是鼠类，传播媒介是蚤类，临床表现较轻，多散发或地方性暴发，病死率可达4.7%。由加拿大立克次体引起的斑疹伤寒以野生动物为传染源，血蜱为媒介，人受血蜱叮咬而致病，主要流行在加拿大林区。
l．外一斐试验是临床上诊断立克次体病常用的血清学试验，为非特异性凝集反应。外一斐凝集素可早在发病4~6d出现，多于2~3周退热前后达最高滴度，然后很快下降，维持数月，5个月后基本消失。外一斐试验宜取双份或三份血清标本（初入院、病程第2周和恢复期），滴定效价达1:160即为阳性，效价有4倍以上增长者具有诊断意义。尽管外一斐试验有不能分型及特异性较差等缺点，但由于抗原易于获得和保存，操作简便，故仍被广泛应用。
2．由立克次体引起的疾病在外一斐试验中的特点如下：
(1)斑疹伤寒患者能产生高滴度的OX19凝集素及低滴度的OX2凝集素，阳性率高达83.5%~93.4%，但不与OXK发生凝集。流行性斑疹伤寒在起病第5~6d时，患者血清即可与OX19发生阳性凝集反应，其凝集效价于第3周达到高峰，一般超过1:320，有时可达1:2 560，阳性率以第4周最高，继而效价迅速下降，于3~6个月内转为阴性。地方性斑疹伤寒患者的血清与变形杆菌OX19发生的凝集反应，凝集效价一般较流行性斑疹伤寒为低，大多在1:160~1:640，阳性反应出现于发病的第5~17d，平均为第11~15天。
(2)恙虫病患者血清可与变形杆菌OXk株发生凝集反应，阳性反应最早在起病第4天即出现，第1周阳性率不高，仅为30%左右，第2周末为60%，第3~4周80%~90%的患者可呈阳性。凝集效价1:80~1:1 280以上不等，多数在1:80~1:640，第1周开始上升，随病程而逐渐增高，第3~4周凝集效价达高峰，第5周开始下降，至第8~9周多数为阴性。
(3)落基山斑点热或蜱传斑点热患者的血清能产生OX19与OX2凝集素，通常为OX19高于OX2，但也有OX2较高者。若仅出现OX2高滴度阳性，则对斑点热有特殊意义。
(4)立克次体痘、Q热及战壕热患者血清中的特异性抗体不能与变形杆菌抗原发生凝集反应，故外一斐试验呈阴性结果。
(5)变形杆菌尿路感染、伤寒、钩端螺旋体病、回归热、疟疾、严重的肝病患者、孕妇等常出现假阳性反应。因此，对其试验结果应结合临床慎重分析和判断。
3．在有条件的实验室，尤其是疫区或进出口检验检疫部门，立克次体的实验室诊断主要依靠分子生物学的方法，如DNA杂交法、限制性核酸内切酶酶切图谱分析、PCR等。
斑点热群立克次体(spottedfever group Rickettsia，SFGR)
是立克次体中最复杂的一群，与节肢动物关系密切，蜱既是传播媒介，又是保存宿主。人感染后出现发热、焦痂、淋巴结肿大、皮疹及头痛等特征。自20世纪70年代以来该病的发病率不断上升，原有疫源地扩大，新病原体不断出现。我国业已从病原学上证实了斑点热的存在。氯霉素及四环素类抗生素对斑点热有效。
斑点热群立克次体感染的临床诊断通常依靠血清学试验，常用方法有：外一斐反应(WF)、乳胶凝集试验(LA)、补体结合试验(CF)、免疫荧光法(IF)、ELISA等。除外斐反应外，其余试验均具有较高的敏感性和特异性。由于血清学方法以检测抗体为主，而发病几星期内病人血清中常无抗体出现，所以血清学试验通常只作为斑点热的回顾性诊断，对急性期治疗并无指导意义。有条件的实验室要开展分子生物学方法检测。
恙虫病群立克次体(tsutugamushi group Rickettsia)
1．又称东方立克次体(R.orientalis)，是恙虫病的病原体，由恙螨叮咬侵入人体，对人致病力强，临床症状发热、虫咬处溃疡、皮疹、淋巴结肿大等。本病流行地区主要是亚洲东南部与大洋洲。我国恙虫病分布地区，已经病原学证实的有广东、海南、福建、广西、浙江、云南、四川、西藏、台湾等省区，并有往北扩散的可能。总之，凡有潮湿丛林和杂草丛生适于恙螨和鼠类寄居的地方，都可能成为疫源地。
2．恙虫病群立克次体的血清学检测方法主要是外一斐反应、免疫荧光试验、ELISA等。分子生物学方法则有重组DNA、PCR，以及蛋白成分检测等。
Q热立克次体(Q fever Rickettsia)
1．学名为贝氏柯克斯体(Coxiella Bumetii)，因它是Q热的病原体而习惯上称之为Q热立克次体。它对人的感染力特别强，是立克次体中唯一能通过气溶胶（不必借助于媒介节肢动物）使人及动物发生感染的病原体。近年来，以心内膜炎为特征的慢性Q热病例死亡率高，抗生素疗效不佳，需引起足够重视。
2．柯克斯体属的DNA碱基组成摩尔百分比与其他属之间区别明显，表明它们之间的亲缘关系较远。Q热立克次体与嗜肺军团菌碱基序列相似率达91.3%，提示二者关系密切oQ热立克次体还是目前立克次体中唯一证明携带质粒的病原体。
1．血清学试验是Q热最常用的实验室检查和特异性诊断方法。常用的是补体结合试验、微量凝集试验、间接免疫荧光技术、ELISA、免疫印迹等。多种分子生物学方法也应用于Q热立克次体检测。
2．由于Q热立克次体存在类似革兰阴性杆菌S-R变异的位相变异，即随宿主不同可表现两相抗原性。2相和I相抗体效价之比有助于鉴别Q热的临床类型：两者比例>1为急性Q热；而≤1则多为Q热性心内膜炎。
其他对人致病的立克次体汉塞巴尔通体(Bartonella henselae)是猫抓病的主要病原体，五日热巴尔通体(Bartonella quintana)可引起急性传染病战壕热（又称五日热），以及腺热埃利希体(Ehreichea sennetsu)和恰菲埃利希体(Ehrlichia chaffeensis)等。
螺旋体(spirochete)螺旋体的基本结构与细菌相似，有细胞壁、核质，对抗生素敏感，分类学上归于细菌范畴。对人和动物致病的有3个属：疏螺旋体属(borrelia)，其中对人致病的有回归热螺旋体和伯氏疏螺旋体；密螺旋体(treponema)，对人致病的有梅毒螺旋体、雅司螺旋体和品他螺旋体等；钩端螺旋体(leptospira)o螺旋体所致疾病主要涉及性传播和自然疫源性疾病。不同种螺旋体所致疾病的种类、传染源、传播途径及临床症状等均不相同，应根据各自的不同特征，在临床不同病期采集合适标本，采用有效检测方法才能确诊，这对预防和治疗螺旋体引起的传染性疾病有着重要意义。
梅毒螺旋体(Treporlema pallidum．TP)
亦称苍白螺旋体，是性传播性疾病(STD)梅毒的病原体。人是梅毒的唯一传染源。梅毒患者的早期损害如硬下疳、扁平湿疣和黏膜白斑最具传染力，其皮肤、黏膜的溃烂或破损区及渗出物中有大量病原体，与之直接接触可传染梅毒。主要的传播途径是性接触传播（约占95%以上），其次是胎传及密切接触如接吻、哺乳等，输入梅毒患者的血液亦可致感染。临床上以早期梅毒（一期、二期梅毒）最多见，占87%。目前梅毒在我国再次流行，在报告的STD病例中处于第4位。它是性病中危害较严重的一种，几乎可侵犯全身各组织和器官，应采取措施予以控制和治疗，防止疾病的进一步扩散。
1．显微镜检查：暗视野显微镜检查是早期梅毒唯一可靠的实验室方法，尤其对已出现硬下疳而梅毒血清反应仍呈阴性者的意义更大，已被世界卫生组织(WHO)指定为性病实验室必备检查项 目之一。直接免疫荧光检查具有高特异性和敏感性，适用于暗视野 显微镜法不适用的标本。其他还有镀银染色法等。
2．血清学实验是诊断梅毒的主要方法，分为两大类。一是非密 螺旋体抗原试验，多用牛心肌的心脂质作为抗原，测定患者血清中 的反应素（抗脂质抗体）o初期梅毒病灶出现后l~2周，血清中反应 素的阳性率为53%~83%，二期梅毒的阳性率可达100%，晚期梅毒 的阳性率为58%~85%，胎传梅毒的阳性率为80%~100%。
常用的试验方法有性病研究所实验室玻片试验(VDRL)、不加 热血清反应素试验(USR)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、甲 苯胺红不加热血清试验(TRUST)。其中USR的方法与VDRL完全 相同，只是改进了抗原制备方法，使血清不必加热灭活；RPR也是 VDRL试验的一种改良，在USR抗原中加入胶体碳作为指示剂， 使试验结果容易判读；TRUST的原理和方法与RPR完全相同，只 是用甲苯胺红染料颗粒代替胶体碳作为指示剂。
此类试验简便、快速、价廉，尤其是RPR和TRUST，便于在一 般实验室推广使用。不仅适用于一二期梅毒的诊断、疗效观察以及 复发或再感染的检测，也适用于大量人群的筛查、婚检、产前检查 和其他健康查体等。此类试验阳性时需用密螺旋体抗原试验进行 确证。
由于此类试验为非特异性抗原试验，因而易发生假阳性反应。
生理性假阳性见于妊娠和老年人(70岁以上可达10%)。生物性假 阳性主要见于结缔组织病和自身免疫性疾病等。
人类免疫缺陷病毒(HIv)感染者的梅毒血清反应有时出现难 以解释的现象，艾滋病合并梅毒感染时，其梅毒血清学试验呈阴性 反应。对怀疑梅毒者，建议同时做HIV抗体检查。
3．另一类血清学试验是密螺旋体抗原试验，即用密螺旋体抗 原检测患者血清中特异性抗体，具有更高的特异性和敏感性，在一 期梅毒的头几天就可检测出特异性抗体，主要用于梅毒的确证，不适用于疗效考察。主要方法有荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TP-PA)、梅毒螺旋体制动试验(TPI)、血清IgM抗体检测、免疫印迹法等。
FTA-ABS被认为是检测梅毒的金标准，对三期梅毒有较高的敏感性和特异性。TPHA具有快速、简便、特异、敏感、无需特殊设备等优点，但对一期梅毒的敏感性不如FIA-ABS。 TPPA与TPHA的原理、方法相同，只是用红色明胶颗粒代替了红细胞。TPI主要用于晚期梅毒及疑难病例的诊断，因操作复杂，临床实验室已很少使用o ELISA法检测血清IgM抗体是目前很多实验室梅毒血清学诊断试验的首选方法。
4．对以上实验方法的选择，WHO推荐用VDRL、RPR法对血清进行过筛试验，出现阳性者用FTA-ABS、TPPA、ELISA(酶联免疫吸附测定法)和免疫印迹试验等方法做确认试验。另外对先天梅毒很难诊断，可用RPR半定量试验每月检测1次反应素效价，连续6个月，或用VDRI，定量试验检查抗体效价变化。如效价增高或稳定在高水平，表明是先天梅毒；如抗体是来自母体的IgG，通常在2—3个月内消失。
5．值得注意的是由于梅毒螺旋体、雅司螺旋体等抗原性相似，所以用血清学试验不可能区别这些密螺旋体及其所致疾病。
非性病密螺旋体
非性病密螺旋体是一组对人致病、但不引起发生STD的密螺旋体。主要有：梅毒螺旋体细长亚种(T.pallidum subspecies-pertenue)，俗称雅司螺旋体，是雅司病的病原体，见于南北回归线之间潮湿而温暖的地区，20世纪40年代我国江苏曾有流行，可累及皮肤和骨骼，临床表现与梅毒相似；梅毒螺旋体皮下亚种引起地方性非性病性梅毒，在非洲、中东、东南亚等地流行，侵犯皮肤、黏膜和骨骼，但先天性感染及心血管、神经系统受累极为罕见；斑点病螺旋体引起品他病，仅累及皮肤，主要流行于中南美洲。
以上三种非性病性螺旋体病的传染源均为人，青少年多见，非性传播，主要通过直接接触感染的皮肤受损处传播，苍蝇也可作为媒介在人与人之间传播。它们的微生物学检验方法与梅毒螺旋体相同，常规方法难以将它们区分开来，需结合流行病学及临床表现加以区分。
钩端螺旋体(Leptospira)
致病性钩端螺旋体能引起人、动物和家畜的钩端螺旋体病(leptospirosis简称钩体病)，是一种典型的人畜共患性疾病。人类接触带菌的野生动物和家畜或它们污染的水源、土壤等时钩体经皮肤进入人体而导致感染。钩体在中性的湿土或水中可存活数月，这在传播上有其重要意义。也可通过胎盘感染而导致流产。钩体对酸和热的抵抗力弱，60℃1min即死亡，0.2%的来苏、1:2000氯化汞、l%苯酚10~30min即可杀死。对青霉素敏感。钩体病为急性传染病，临床表现为高热、全身酸痛，尤其是腓肠肌疼痛，严重者可表现为全身内脏出血和坏死，甚至导致死亡。
钩端螺旋体感染的标本采集方法
1．血液：于发病1周内的钩体血症期，在抗生素治疗前以无菌操作抽取静脉血，即刻接种进行培养或动物实验，此时的阳性检出率较高。患者于发病1周左右开始出现特异性lgM抗体，lgG继之，于病程1个月左右其效价达高峰，抗体可持续数月至数年。常于发病初期和恢复期采集双份血液，测定血清抗体滴度的消长，或采集单份血样测定IgM抗体，有助于早期诊断。
2．尿液：发病第2周起患者尿中逐渐出现钩体，第3周达高峰。由于肾脏中钩体不受血液中特异性抗体的影响，故患者持续从 尿液中排菌可达数周之久。留取标本前需碱化尿液。
3．脑脊液：发病1周内患者可出现脑膜炎症状，在抗生素治疗 前于无菌条件下做腰穿，收集脑脊液。
4．组织：当疑有钩体病的患者或动物死亡后，在最短的时间内 取其肝脏或肾脏组织。
病原学检验包括直接镜检，如直接暗视野镜检、改良镀银染 色、直接荧光抗体检查，分离培养（在致病性螺旋体中，钩体较易培 养成功）以及动物实验等。血清学试验的方法包括显微镜凝集试验 （单份血清效价为1:400或恢复期抗体效价较急性期有4倍以上升 高即有诊断意义）、间接凝集试验（单份血清效价为1:160或恢复期 抗体效价较急性期有4倍以上升高即有诊断意义）、补体结合试验 （血清效价在1:20以上就有诊断意义，病后2~3d就可测出，可协助 早期诊断，但不能分型）、溶血试验、ELISA(用于检测特异性lgM抗 体，特异性和敏感性都高，具有早期诊断价值)；DNA探针杂交、 PCR等分子生物学方法也已引入钩体病的诊断。
伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi．Bb)
又称莱姆螺旋体(Lyme spirochete)o可引起由硬蜱传播的自然 疫源性疾病——莱姆病(Lyme disease．LD)。临床上主要表现为皮 肤慢性移行性红斑(ECM)，以及神经系统、心脏、关节等多脏器、多 系统损伤。该病好发于春夏季，在美洲、欧洲、澳洲及我国东北林区 都有发现，黑龙江省海林县林区是我国的高发区，患者多有蜱叮咬 史，目前在我国10多个省区已分离到Bb。
1．实验室诊断通常采用血清学试验方法，如间接免疫荧光测 定(IFA)、ELISA、IgM检测以及免疫印迹法等。分子生物学技术，如 核酸分子杂交、PCR等，也已广泛应用于LD的诊断和Bb的遗传学分析。
2．药敏：Bb对四环素高度敏感，对氨苄西林、头孢曲松、亚胺培南等高度敏感，对氨基糖苷类、利福平、环丙沙星多耐药。
回归热螺旋体(B.recurren-tis)
回归热是一种以周期性反复发作为特征的急性传染病。引起该病的疏螺旋体有两种：一是回归热螺旋体(B.recurren-tis)，以体虱为传播媒介，引起流行性回归热，目前该病在世界范围内已基本消灭；另一是赫姆疏螺旋体(B.hertmsii)，以软蜱为传播媒介，引起地方性回归热，我国主要见于南疆、山西等地，比较少见。两者临床表现基本相同，为急起急退的发热、全身肌肉酸痛、肝脾肿大，前者更重。
奋森螺旋体(Borrelia vincenti)
正常情况下与梭杆菌等寄居于人类口腔牙龈部。机体抵抗力下降时可引起奋森咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口腔炎等，对青霉素、四环素多敏感。
支原体()
支原体是一类没有细胞壁的原核细胞微生物，通常被划分为远离一般细菌的范畴。实际上真正的支原体仅仅是退化了的芽孢梭菌属细菌。支原体科分为支原体()和脲原体(up-reaplasma)两个属。支原体属有70～100种，其中对人致病的主要是肺炎支原体，生殖支原体也有一定致病性；脲原体属则只有解脲脲原体和人型支原体。支原体因无细胞壁而对理化因素的影响比细菌更敏感，容易被清洁剂和消毒剂灭活，但对醋酸铊、甲醛的抵抗力大于细菌。支原体对干扰细胞壁合成的抗生素，如青霉素类、头孢菌素类、多肽类等耐药，但对干扰蛋白质合成的抗生素，如大环内酯类的红霉素、阿奇霉素，四环素类，氯霉素等多敏感。
肺炎支原体(M.pneumordae，MP)
肺炎支原体是引起**型性肺炎最常见的病原体。支原体肺 炎的发病率可占到所有肺炎病例的20%～30%。易感对象主要是 5~19岁的儿童和年轻人。但近年来发现65岁以上老年人群发生 的社区获得性肺炎中有15%是MP引起的，5岁以下的婴幼儿也 可发生感染，且这些人群一旦发病，症状往往更为严重。支原体肺 炎同时具有地方性和周期性流行的特点，流行周期一般为3—7年。
在流行高峰时，其发病率可达到肺炎总发病率的70%~80%。MP感 染可发生在一年中的任何季节，没有明显的季节流行特征。
1．由于MP培养耗时长(2～3周)，对标本运送及培养基的要求 高，且敏感性一般，而抗原检测及分子生物学方法虽有报道，但尚 无成熟的试剂盒，故病原学检测方法目前很少用作临床常规检测， 但对流行病学调查有一定意义。
2．血清学检测是目前MP临床实验室诊断的主要方法o MP感 染后，可用各种血清学试验检测体内产生的特异性抗体，其中lg水平升高提示MP的新近感染，但阴性时并不能排除MP感 染的可能性。单份血清测定出现高滴度的IgG或双份血清测定（前 后间隔2周）出现lgG滴度4倍以上升高的也提示MP的新近感 染。单测一种类型的抗体往往会出现漏检的情况，因此，应同时检 测几种类型的抗体，有疑问时还应通过双份血清测定观察抗体转 化情况以进行明确诊断。
3．冷凝集试验(cold agglutination test)：是以前常用的MP检测 方法。支原体肺炎患者血清中常可出现高效价的寒冷凝集素（一种 lgM类非特异性抗体），在O~10℃的寒冷情况下，能与O型人红细 胞或自身红细胞的膜抗原结合产生凝集现象。大多在发病后1~2 周开始出现，以后继续增高，于病程3~4周达到高峰，6周后逐渐下降，2~3个月后消失。寒冷凝集素效价≥1:32，或间隔l周以上的2次血清效价有4倍以上增长，对支原体肺炎的诊断有参考意义。
但敏感性和特异性均差，呼吸道合胞病毒感染、腮腺炎、流感等也可出现冷凝集素滴度的非特异性升高，而敏感性不足50%该方法目前已趋于淘汰。另外，试验时必须及时分离血清，决不能在4℃冷藏后分离，切勿将待测血液标本留置20℃以下，室温低于20℃时，应注意放37℃分离。
4．其他血清学试验方法的比较：补体结合试验(正常参考值<1:8)特异性优于冷凝集试验，但由于测定的主要是IgM，因此敏感性偏低；酶免疫测定应强调同时检测lgG和lgM(或IgA)，以提高敏感性；快速检测以金标法最为常见，也应强调同时检测IgG和Ig)，只测定lgM往往不能得到正确的结果，而且快速方法一般只能得到定性结果，这限制了其在临床诊断中的价值。
5．药敏：MP没有细胞壁，因此对β-内酰胺类抗生素天然耐药，磺胺类一般对其也没有作用，治疗的首选药物为大环内酯类，也可选用四环素类（老年人）和喹诺酮类。
解脲脲原体(U.ureaiyicum，Uu)、人型支原体(M hominis．Mh相生殖支原体(M.genitalium．Mg)
1．Uu、Mh和Mg是人类泌尿生殖道最常见的寄生菌，在特定的环境下可以致病，与一些新生儿疾病及成人的泌尿生殖系统疾病有关。它们的主要传播途径为性接触传播和母婴传播。所引起的新生儿疾病主要表现为呼吸道感染和支气管、肺发育不良，以及新生儿中枢神经系统感染等。现已将其引起的泌尿生殖道感染列为性传播性疾病(STD)o有30%~40%的非淋病性尿道炎(nongono-coccal urethritis，NGU)是由Uu所致。 Uu也是引起慢性前列腺炎的病原体之一，为通过尿道上行感染所致，称为“脲原体相关性前列腺炎”。Uu还可导致尿路结石。生殖系统Uu感染可导致不孕不育、自发性流产、早产及死胎等。Mh在性成熟女性的子宫或**的携带率为21%~53%，与女性的激素水平、性经历、避孕方式和文化程度等密切相关。男性携带率低，主要引起输卵管炎、子宫颈炎、盆腔炎，以及新生儿感染等。生殖支原体(M.genitalium，Mg)具有特殊的结构和黏附性，也是泌尿生殖道的重要致病因子，可能与女性的上生殖道感染、新生儿的呼吸道感染等有关。
2．它们的临床实验室诊断方法主要有分离培养、免疫斑点试验(IDT）以及PCR技术扩增特异基因片段等。
(1)直接镜检法：该法简便易行，但临床意义不大，因支原体形态、大小难与组织细胞或渗出液中的其他颗粒相区别，即便阳性，亦需作分离培养。
(2)分离培养法：分离培养是实验诊断支原体感染的唯一可靠方法。支原体分离培养阳性伴有尿道炎症状者，是非淋菌性尿道炎的指征。现已有商品化的支原体培养试剂盒。
(3)血清学检查法：间接血凝法、ELISA、免疫沉淀法等均可测出血清中的支原体抗体。由于人群中普遍具有低滴度的支原体抗体，因此血清学检查必须与支原体分离培养相结合，才能明确诊断。
(4)聚合酶链反应(PCR)：PCR法是检测解脲脲原体的有效方法，具有特异、灵敏、快速的特点，但有假阳性或假阴性的结果。
3．AIDS协同感染。
近年来发现有三种支原体为AIDS协同感染因子，能促使无症状HIV感染者发展为有症状的AIDSo它们分别是发酵支原体(M.ferans)和梨形支原体(M.pirum)。它们在HIV的感染过程中究竟起什么作用，目前还不清楚，但这三种支原体新种，尤其是后二者都具有特殊的尖端结构及吸附宿主细胞的作用，因此已引起人们的高度重视。
衣原体(Chlamydia)
衣原体是一类专性细胞内寄生、有独特发育周期、能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。由于它具有一些与细菌类似的生物学特性，现归属于广义的细菌范畴。衣原体广泛寄生于人类、鸟类及哺乳动物。不同衣原体所致疾病不同，有些只引起动物疾病，如沙眼衣原体中的鼠亚种和鹦鹉热衣原体中的大多数菌株。有些只引起人类疾患，如沙眼衣原体中的沙眼亚种和性病淋巴肉芽肿亚种以及肺炎衣原体。有些是人兽共患病原体，如鹦鹉热衣原体中的部分菌株。肺炎衣原体、沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体一般对四环素和大环内酯类抗生素均敏感，沙眼衣原体对磺胺类多敏感，而其他二者耐药。
沙眼衣原体(C.trachomatis)
1．沙眼衣原体分为三个生物变种，即沙眼生物变种(biovartra-choma)、性病淋巴肉芽肿生物变种(biovar lyvenereum．LGV)和鼠生物变种(biovar mouse)o2．沙眼生物变种专门寄生于人类，易感部位是黏膜的鳞状上皮细胞。人与人之间的传播方式有两种明显不同类型：在沙眼流行地区，主要通过眼一眼及眼一手一眼传播，引起地方性致盲沙眼；另一种系性接触传播，是STD中最常见的病原体，可引起泌尿生殖系感染、新生儿经产道时感染以及其他合并症，主要有新生儿包涵体结膜炎、新生儿肺炎、NGU、附睾炎、前列腺炎、官颈炎、输卵管炎、直肠炎等，且在女性易致不育和异位妊娠等严重后果。
1．对急性期沙眼或包涵体结膜炎患者，以临床诊断为主，实验室检查可取眼穹隆部及眼结膜分泌物做涂片，染色检查上皮细胞内有无包涵体。
2．对泌尿生殖道感染，临床症状不典型，主要依靠实验室检查，可采集泌尿生殖道标本做Giemsa或碘液染色检查包涵体，但敏感性差，阳性率仅约40%。细胞培养法是目前生殖道衣原体检测的最好方法。而且是评价其他实验室诊断方法的“金标准”，目前已有商品化的试剂盒。衣原体分离培养阳性伴有尿道炎症状者，是非淋菌性尿道炎的指征。从尿道炎患者中分离获得衣原体，并不能断定它是唯一的病原体。因为在30%~50%的非淋菌性尿道炎患者、20%的淋病患者和5%性活跃但无尿道炎症状的人群中，用细胞培养法均可找到沙眼衣原体。
3．采用直接荧光抗体检测标本内的衣原体，一般要求衣原体数>IO个方可判为阳性。有条件的实验室可采用DNA探针和PCR技术、PCR-EIA技术、连接酶链反应(LCR)检测衣原体特异性基因片段。目前还有一些商品化的快速诊断衣原体抗原的方法，如乳胶免疫扩散法、利用单克隆抗体检测衣原体LPS法等。
4．人是性病淋巴肉芽肿亚种(LGV)的天然宿主，经性接触传播，主要侵犯淋巴组织，引起多种临床症状，典型症状是男性腹股沟淋巴肉芽肿。在女性侵犯会阴、肛门和直肠，可形成肠皮肤瘘管；也可引起会阴一肛门一直肠狭窄和梗阻。可采用微量免疫荧光法检测，与其他型沙眼衣原体交叉反应较低，有较高的诊断价值。
肺炎衣原体(C.pneumoniae．衣原体TWAR株)
肺炎衣原体只有一个血清型，即TWAR株，可引起急性呼吸道疾病。社区获得性肺炎、支气管炎和鼻窦炎5%~10%由衣原体引起，还可引起心包炎、心肌炎和心内膜炎，还与冠状动脉疾病有关。
TWAR株只寄生于人类，人与人之间经飞沫或呼吸道分泌物传播。
感染的扩散缓慢，患者之间的传播间隔期平均为30d，在密集人群中流行可持续6个月。TWAR株的感染具有散发和流行交替出现的周期性。散发发病通常持续3~4年，有2~3年的流行期，在流行期间可有数月的短暂暴发。
1．TWAR株感染的实验室诊断，包括病原体分离、血清学检查和特异性核酸片段检测。分离TWAR株比较困难，不适于临床实验室。血清学检查以微量免疫荧光试验(Micro-IF)最为敏感，还可采用补体结合试验。宿主感染TWAR后抗体的出现表现为两种模式：在青少年经常出现初次感染后的免疫反应，早期出现的是补体结合抗体，Micro-IF的抗体出现缓慢，发病3周后不能检测出可达诊断水平的lgM抗体效价，IgG抗体通常6周后才出现；在成年人则表现为再次感染的免疫反应，迅速出现对TWAR株的Micro-IF的IgG抗体，但补体结合抗体通常不出现，IgM抗体不出现或效价偏低(1:32~1:64)。用TWAR抗原进行Micro-IF检测时，急性感染的诊断标准是：双份血清抗体效价有4倍以上升高，IgM抗体效价≥1:16;lgG抗体效价≥1:512。补体结合试验的急性感染诊断标准是：双份血清抗体效价有4倍以上升高，抗体效价≥1:640值得注意的是，血循环中的类风湿因子可以干扰Micro-IF的结果。
2．如上所述，由于感染后lgG抗体存在时间较长，再感染时IgM和补体结合抗体又常为阴性，血清学实验有时难以区分初次感染和再感染，有条件的实验室可采用特异性核酸检测的方法。
鹦鹉热衣原体(C.psittaci)
鹦鹉热衣原体主要引起禽畜感染，少数可因吸入病禽或病兽的感染性分泌物而传染到人，引起呼吸道症状甚至发生肺炎或不明原因的发热，但不很严重，临床上称为鹦鹉热或鸟疫。近年来有鹦鹉衣原体引起心内膜炎的报道。
立克次体(Rickettsia)
立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。其生物学形状与细菌类似，革兰染色阴性，具有细胞壁，有DNA和RNA，对多种抗生素敏感。其共同特点是：大多是人畜共患病：所致疾病多数为自然疫源性疾病；与节肢动物关系密切，或为寄生宿主，或为储存宿主，或同时为传播媒介；专性细胞内寄生；多形态性，主要为球杆状；大小介于细菌和病毒之间，生长时需要宿主细胞提供生长辅助因子。
对人类致病的立克次体包括4个属：立克次体属(rickettsia)、柯克斯体属(coriella)、巴尔通体属(bartoneleaceae)，原称为罗沙利马体属和埃里希体属(ehrlichia)。立克次体属又分为三个生物型：斑点伤寒群、斑点Q热群、恙虫病群。立克次体是引起斑疹伤寒、恙虫病、Q热等传染病的病原体，虽然在流行病学上各自有所不同，但临床表现多有共同之处。潜伏期多为3~14d，约有一半病例为突然起病，以发热、皮疹为主要特征。
四环素、利福平、氟喹诺酮类（恙虫病立克次体除外）和某些大环内酯类抗生素在体外抗立克次体有效，而青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、磺胺类等无效。
立克次体斑疹伤寒群(typhus group)
1．有三种：一是引起流行性（虱传）斑疹伤寒的普氏立克次体(R．prowazekii)；二是引起地方性（鼠型）斑疹伤寒的莫氏立克次体(R.mooserii)）三是引起加拿大斑疹伤寒的加拿大立克次体(R.Cana-da)。普氏和莫氏立克次体所致的斑疹伤寒症状相似，以头痛、高热、全身皮疹为主要特征。加拿大立克次体所致疾病表现为高热、头痛、畏寒，手掌、腿和腹部出现皮疹。
2．普氏立克次体（又称典型或复发性）斑疹伤寒，主要传染源是病人，传播媒介为（人）体虱，可引起大规模流行，其范围成世界性分布，未经治疗的病人死亡率可高达10%~40%。由莫氏立克次体所致鼠型斑疹伤寒的传染源是鼠类，传播媒介是蚤类，临床表现较轻，多散发或地方性暴发，病死率可达4.7%。由加拿大立克次体引起的斑疹伤寒以野生动物为传染源，血蜱为媒介，人受血蜱叮咬而致病，主要流行在加拿大林区。
l．外一斐试验是临床上诊断立克次体病常用的血清学试验，为非特异性凝集反应。外一斐凝集素可早在发病4~6d出现，多于2~3周退热前后达最高滴度，然后很快下降，维持数月，5个月后基本消失。外一斐试验宜取双份或三份血清标本（初入院、病程第2周和恢复期），滴定效价达1:160即为阳性，效价有4倍以上增长者具有诊断意义。尽管外一斐试验有不能分型及特异性较差等缺点，但由于抗原易于获得和保存，操作简便，故仍被广泛应用。
2．由立克次体引起的疾病在外一斐试验中的特点如下：
(1)斑疹伤寒患者能产生高滴度的OX19凝集素及低滴度的OX2凝集素，阳性率高达83.5%~93.4%，但不与OXK发生凝集。流行性斑疹伤寒在起病第5~6d时，患者血清即可与OX19发生阳性凝集反应，其凝集效价于第3周达到高峰，一般超过1:320，有时可达1:2 560，阳性率以第4周最高，继而效价迅速下降，于3~6个月内转为阴性。地方性斑疹伤寒患者的血清与变形杆菌OX19发生的凝集反应，凝集效价一般较流行性斑疹伤寒为低，大多在1:160~1:640，阳性反应出现于发病的第5~17d，平均为第11~15天。
(2)恙虫病患者血清可与变形杆菌OXk株发生凝集反应，阳性反应最早在起病第4天即出现，第1周阳性率不高，仅为30%左右，第2周末为60%，第3~4周80%~90%的患者可呈阳性。凝集效价1:80~1:1 280以上不等，多数在1:80~1:640，第1周开始上升，随病程而逐渐增高，第3~4周凝集效价达高峰，第5周开始下降，至第8~9周多数为阴性。
(3)落基山斑点热或蜱传斑点热患者的血清能产生OX19与OX2凝集素，通常为OX19高于OX2，但也有OX2较高者。若仅出现OX2高滴度阳性，则对斑点热有特殊意义。
(4)立克次体痘、Q热及战壕热患者血清中的特异性抗体不能与变形杆菌抗原发生凝集反应，故外一斐试验呈阴性结果。
(5)变形杆菌尿路感染、伤寒、钩端螺旋体病、回归热、疟疾、严重的肝病患者、孕妇等常出现假阳性反应。因此，对其试验结果应结合临床慎重分析和判断。
3．在有条件的实验室，尤其是疫区或进出口检验检疫部门，立克次体的实验室诊断主要依靠分子生物学的方法，如DNA杂交法、限制性核酸内切酶酶切图谱分析、PCR等。
斑点热群立克次体(spottedfever group Rickettsia，SFGR)
是立克次体中最复杂的一群，与节肢动物关系密切，蜱既是传播媒介，又是保存宿主。人感染后出现发热、焦痂、淋巴结肿大、皮疹及头痛等特征。自20世纪70年代以来该病的发病率不断上升，原有疫源地扩大，新病原体不断出现。我国业已从病原学上证实了斑点热的存在。氯霉素及四环素类抗生素对斑点热有效。
斑点热群立克次体感染的临床诊断通常依靠血清学试验，常用方法有：外一斐反应(WF)、乳胶凝集试验(LA)、补体结合试验(CF)、免疫荧光法(IF)、ELISA等。除外斐反应外，其余试验均具有较高的敏感性和特异性。由于血清学方法以检测抗体为主，而发病几星期内病人血清中常无抗体出现，所以血清学试验通常只作为斑点热的回顾性诊断，对急性期治疗并无指导意义。有条件的实验室要开展分子生物学方法检测。
恙虫病群立克次体(tsutugamushi group Rickettsia)
1．又称东方立克次体(R.orientalis)，是恙虫病的病原体，由恙螨叮咬侵入人体，对人致病力强，临床症状发热、虫咬处溃疡、皮疹、淋巴结肿大等。本病流行地区主要是亚洲东南部与大洋洲。我国恙虫病分布地区，已经病原学证实的有广东、海南、福建、广西、浙江、云南、四川、西藏、台湾等省区，并有往北扩散的可能。总之，凡有潮湿丛林和杂草丛生适于恙螨和鼠类寄居的地方，都可能成为疫源地。
2．恙虫病群立克次体的血清学检测方法主要是外一斐反应、免疫荧光试验、ELISA等。分子生物学方法则有重组DNA、PCR，以及蛋白成分检测等。
Q热立克次体(Q fever Rickettsia)
1．学名为贝氏柯克斯体(Coxiella Bumetii)，因它是Q热的病原体而习惯上称之为Q热立克次体。它对人的感染力特别强，是立克次体中唯一能通过气溶胶（不必借助于媒介节肢动物）使人及动物发生感染的病原体。近年来，以心内膜炎为特征的慢性Q热病例死亡率高，抗生素疗效不佳，需引起足够重视。
2．柯克斯体属的DNA碱基组成摩尔百分比与其他属之间区别明显，表明它们之间的亲缘关系较远。Q热立克次体与嗜肺军团菌碱基序列相似率达91.3%，提示二者关系密切oQ热立克次体还是目前立克次体中唯一证明携带质粒的病原体。
1．血清学试验是Q热最常用的实验室检查和特异性诊断方法。常用的是补体结合试验、微量凝集试验、间接免疫荧光技术、ELISA、免疫印迹等。多种分子生物学方法也应用于Q热立克次体检测。
2．由于Q热立克次体存在类似革兰阴性杆菌S-R变异的位相变异，即随宿主不同可表现两相抗原性。2相和I相抗体效价之比有助于鉴别Q热的临床类型：两者比例>1为急性Q热；而≤1则多为Q热性心内膜炎。
其他对人致病的立克次体汉塞巴尔通体(Bartonella henselae)是猫抓病的主要病原体，五日热巴尔通体(Bartonella quintana)可引起急性传染病战壕热（又称五日热），以及腺热埃利希体(Ehreichea sennetsu)和恰菲埃利希体(Ehrlichia chaffeensis)等。