第二节 抗人类免疫缺陷病毒抗体检测
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(anti-huy virus anti-HIV)
HIV是获得性免疫缺陷综合征(AIDS,艾滋病)的病原体。HIV属于逆转录病毒科慢病毒属中的灵长类免疫缺陷病毒亚属,主要通过血液、性传播、母婴垂直传播等途径传播。由于HIV感染的主要靶细胞是CD4+T淋巴细胞、单核吞噬细胞,使该类细胞大量减少,机体免疫系统受到破坏,免疫调节紊乱,细胞免疫功能缺陷,致使机体极易合并多种微生物的机会感染或发生肿瘤。
ELISA法,IFA法:阴性。
WB法:阴性。
1.感染了HIV,可作为传染源将HIV传播给他人。
2.抗HIV阳性者(除外18m的婴儿),Sy之内将有10%~30%的人发展为艾滋病。
3.抗-HIV检测不适用于婴儿感染的早期诊断,这是因为婴儿可以在出生前通过胎盘和出生后通过乳汁被动获得母体的抗一HIV IgG,在出生后8~14m内逐渐消失,18m以后,婴儿的免疫系统才能产生自己的抗体。因此,HIV阳性母亲所生婴儿检出抗一HIV不一定表明已受到HIV感染。动态观察HIV阳性母亲所生婴儿的抗-HIV,将发现出生后其抗-HIV为阳性,经过一段时间后,抗体将会转为阴性。如果18m以后,婴儿的血清又出现HIV抗体阳性反应,提示婴儿真正感染了病毒。
1.有过危险行为需要等窗口期过了以后再检测。多数人在感染以后3m内可以产生抗体,平均是1m,个别情况下可能延迟到6m,因此,现在一般推荐在可疑感染后3m和6m各检测1次,6m以后检测HIV抗体阴性基本可以确认没有感染HIV。
2.HIV筛查试验的基本程序是:1初筛试验:标本验收合格后,用初筛试剂进行抗体检测,如呈阴性反应,报告HIV抗体阴性;对呈阳性反应的标本,须进行重复检测。2重复检测:对初筛试验呈阳性反应的标本,用两种不同原理或不同厂家的试剂重复检测,如两种试剂复测均呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确认。应尽可能将重新采集的受检者血液标本和原有标本一并送检。
3.ELISA法检测抗HIV阳性而确认实验阴性是HIV检测经常出现的情况,说明ELISA的阳性结果为假阳性。假阳性反应的原因多数尚不清楚。经验证明,一些含有针对HLA抗原的抗体和患自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、风湿病等)、寄生虫病(如疟疾等)、其他病毒病(如病毒性肝炎等)患者以及孕妇、经常输血的患者的血清标本容易出现假阳性。越是在传染病流行率高、病种复杂的地区,发生假阳性反应的越多,这可能是由于一些传染病病原体与HIV某些抗原决定簇有交叉反应,在分析初筛实验结果时必须考虑到这些因素。
4.HIV确认实验的结果“HIV抗体不确定”,指的是HIV抗体确认不是阴性、但又不能满足判断阳性的标准。不仅初筛阳性的标本可以出现不确定的结果,初筛阴性的标本做确认检测时也有大 约15%出现不确定结果。原因一般有两个方面,一种可能是处于HIV感染的早期,在这一时期HIV抗体应答还不完善,特征性的抗体还没有出现;另一种情况是假阳性。对不确定结果都应进行随访,随访时间为1~6m不等。如果6m以后,带型消失或没有进展,可以排除HIV感染;如果在随访的过程中出现了带型的进展,特别是出现了包膜抗原的条带,可以确定是早期HIV感染。持续的不确定结果则提示非特异反应,如高球蛋白血症、饮食或由于其他病原微生物感染导致存在交叉反应的抗体等。
1.实验操作过程中洗涤应彻底,以避免假阳性结果发生。
2.注意防止交叉感染,在检测前所有标本均视为生物危险品。
3.待测血清应在采集后即时检测,否则应置-20℃冻存。(不宜超过-w)。在4℃保存,超过48h会使一些弱阳性标本转为阴性。
4.检测对象如为高丙种球蛋白血症、自身免疫病和某些肿瘤患者,血样污染,待测血清反复冻融或有免疫符合物存在均可造成假阳性结果。
(anti-huy virus anti-HIV)
HIV是获得性免疫缺陷综合征(AIDS,艾滋病)的病原体。HIV属于逆转录病毒科慢病毒属中的灵长类免疫缺陷病毒亚属,主要通过血液、性传播、母婴垂直传播等途径传播。由于HIV感染的主要靶细胞是CD4+T淋巴细胞、单核吞噬细胞,使该类细胞大量减少,机体免疫系统受到破坏,免疫调节紊乱,细胞免疫功能缺陷,致使机体极易合并多种微生物的机会感染或发生肿瘤。
ELISA法,IFA法:阴性。
WB法:阴性。
1.感染了HIV,可作为传染源将HIV传播给他人。
2.抗HIV阳性者(除外18m的婴儿),Sy之内将有10%~30%的人发展为艾滋病。
3.抗-HIV检测不适用于婴儿感染的早期诊断,这是因为婴儿可以在出生前通过胎盘和出生后通过乳汁被动获得母体的抗一HIV IgG,在出生后8~14m内逐渐消失,18m以后,婴儿的免疫系统才能产生自己的抗体。因此,HIV阳性母亲所生婴儿检出抗一HIV不一定表明已受到HIV感染。动态观察HIV阳性母亲所生婴儿的抗-HIV,将发现出生后其抗-HIV为阳性,经过一段时间后,抗体将会转为阴性。如果18m以后,婴儿的血清又出现HIV抗体阳性反应,提示婴儿真正感染了病毒。
1.有过危险行为需要等窗口期过了以后再检测。多数人在感染以后3m内可以产生抗体,平均是1m,个别情况下可能延迟到6m,因此,现在一般推荐在可疑感染后3m和6m各检测1次,6m以后检测HIV抗体阴性基本可以确认没有感染HIV。
2.HIV筛查试验的基本程序是:1初筛试验:标本验收合格后,用初筛试剂进行抗体检测,如呈阴性反应,报告HIV抗体阴性;对呈阳性反应的标本,须进行重复检测。2重复检测:对初筛试验呈阳性反应的标本,用两种不同原理或不同厂家的试剂重复检测,如两种试剂复测均呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确认。应尽可能将重新采集的受检者血液标本和原有标本一并送检。
3.ELISA法检测抗HIV阳性而确认实验阴性是HIV检测经常出现的情况,说明ELISA的阳性结果为假阳性。假阳性反应的原因多数尚不清楚。经验证明,一些含有针对HLA抗原的抗体和患自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、风湿病等)、寄生虫病(如疟疾等)、其他病毒病(如病毒性肝炎等)患者以及孕妇、经常输血的患者的血清标本容易出现假阳性。越是在传染病流行率高、病种复杂的地区,发生假阳性反应的越多,这可能是由于一些传染病病原体与HIV某些抗原决定簇有交叉反应,在分析初筛实验结果时必须考虑到这些因素。
4.HIV确认实验的结果“HIV抗体不确定”,指的是HIV抗体确认不是阴性、但又不能满足判断阳性的标准。不仅初筛阳性的标本可以出现不确定的结果,初筛阴性的标本做确认检测时也有大 约15%出现不确定结果。原因一般有两个方面,一种可能是处于HIV感染的早期,在这一时期HIV抗体应答还不完善,特征性的抗体还没有出现;另一种情况是假阳性。对不确定结果都应进行随访,随访时间为1~6m不等。如果6m以后,带型消失或没有进展,可以排除HIV感染;如果在随访的过程中出现了带型的进展,特别是出现了包膜抗原的条带,可以确定是早期HIV感染。持续的不确定结果则提示非特异反应,如高球蛋白血症、饮食或由于其他病原微生物感染导致存在交叉反应的抗体等。
1.实验操作过程中洗涤应彻底,以避免假阳性结果发生。
2.注意防止交叉感染,在检测前所有标本均视为生物危险品。
3.待测血清应在采集后即时检测,否则应置-20℃冻存。(不宜超过-w)。在4℃保存,超过48h会使一些弱阳性标本转为阴性。
4.检测对象如为高丙种球蛋白血症、自身免疫病和某些肿瘤患者,血样污染,待测血清反复冻融或有免疫符合物存在均可造成假阳性结果。